組織解離液

描述：

組織解離液是由多種生物酶組成的混合物，可溫和、快速、高效地將組織中的結(jié)締組織酶解并釋放出細(xì)胞，形成細(xì)胞懸液。組織解離液適用于脾臟、肝臟、腎臟、胰腺、胃黏膜組織、膽囊、腫瘤組織等多種組織的細(xì)胞分離。解離組織獲得的細(xì)胞具有高活性，可保留細(xì)胞的表面抗原等特點(diǎn)，細(xì)胞可用于細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞分選、藥物篩選、單細(xì)胞測(cè)序等。

使用方法：

所需試劑、耗材、器械與儀器：
試劑：細(xì)胞培養(yǎng)基，紅細(xì)胞裂解液（選用）
耗材：離心管，一次性無(wú)菌過(guò)濾器（70µm）
儀器：恒溫?fù)u床，離心機(jī)

操作步驟：
(1) 取新鮮組織 100mg 左右加至無(wú)菌離心管中，用專(zhuān)用剪將剪至 1-2mm3 ，加入組織液 1ml。
(2) 將離心管置于恒溫?fù)u床上，37℃/180rpm 震蕩孵育 60min 消化組織，可根據(jù)組織的不同適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間。
(3) 孵育結(jié)束后將離心管內(nèi)的組織勻漿用 70µm 無(wú)菌過(guò)濾器過(guò)濾，然后加入細(xì)胞培養(yǎng)基沖洗無(wú)菌過(guò)濾器，用 50ml 的離心管收集濾液。
(4) 將細(xì)胞懸液 1200rpm 離心 5min ，棄上清。
(5) 再加入適量培養(yǎng)基，1200rpm 離心 5min，棄上清。
(6) 用細(xì)胞培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，取少量細(xì)胞鏡下觀察消化情況。
(7) 根據(jù)需要將細(xì)胞用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
(8) （可選）可使用紅細(xì)胞裂解液去除組織解離過(guò)程中的紅細(xì)胞。

注意事項(xiàng)：

1、組織解離液可根據(jù)實(shí)際使用量進(jìn)行分裝，置于-20℃保存，隨用隨取，避免反復(fù)凍融。
2、組織解離液 2-8℃保存應(yīng)不超過(guò) 48h, 2-8℃長(zhǎng)時(shí)間保存會(huì)降低產(chǎn)品的解離效果。
3、若組織解離獲取的細(xì)胞用于細(xì)胞培養(yǎng)，應(yīng)保證所有操作均在無(wú)菌條件下完成。