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                PI細胞周期與凋亡試劑盒

                簡要描述:PI細胞周期與凋亡試劑盒產品基于碘化丙啶(Propidium, PI)染色方法分析細胞周期 和凋亡。碘化丙啶是一種雙鏈DNA染料,其嵌入雙鏈DNA中可以 產生熒光,熒光的強度和雙鏈DNA的量成正比。

                • 產品型號:abs50005
                • 廠商性質:生產廠家
                • 更新時間:2025-06-13
                • 訪  問  量:2228

                詳細介紹

                品牌absin貨號abs50005
                供貨周期現貨應用領域生物產業
                產品描述
                描述

                        本產品基于碘化丙啶(Propidium, PI)染色方法分析細胞周期 和凋亡。碘化丙啶是一種雙鏈DNA染料,其嵌入雙鏈DNA中可以 產生熒光,熒光的強度和雙鏈DNA的量成正比。

                        在正常細胞周期中,G0和G1期有1套染色體,G2和M期細胞 有2套染色體,S期介于兩者之間。經PI染色后,處在不同細胞周 期中的細胞的熒光強度不同。假定G0和G1期的細胞熒光強度為 1,那么G2和M期的細胞的熒光強度為2,S期的細胞介于1和2之 間。

                        PI細胞周期與凋亡試劑盒細胞凋亡時,由于細胞核皺縮和DNA的片段化,染色時DNAd的片 段會從打孔的細胞膜處丟失,流式細胞儀檢測時,熒光強度小于 1,即Sub-G1峰或者凋亡細胞峰。

                        細胞凋亡也可以用流式細胞儀觀察細胞光散射的變化來檢 測。凋亡前期,染色質皺縮,細胞密度增加,前向角光散色顯著 降低。凋亡后期,細胞產生凋亡小體,前向角光散射和側向角光 散色都顯著降低。

                PI細胞周期與凋亡試劑盒產品組分:

                編號名稱50T
                APropidium Iodide(20×)1.25ml 
                BRNase A(50×)500 μl 
                CStaining Buffer25ml
                應用
                本產品用于培養的貼壁細胞或者懸浮細胞檢測,也可用于組織細胞檢測。
                使用方法
                自備耗材和設備:
                1 ml 移液器
                100-200 μl 移液器
                旋窩混勻儀
                流式細胞儀
                PBS
                75%乙醇

                適用實驗與操作過程:
                1、細胞準備 貼壁細胞:棄細胞培養液,胰酶消化,制備單細胞懸液, 1000 g離心5分鐘,棄上清。沉淀用1 ml預冷的PBS重懸。再次 1000 g離心5分鐘,棄上清。 懸浮細胞:收集細胞懸液,1000 g離心5分鐘,棄上清。沉淀 用1 ml預冷的PBS重懸。再次1000 g離心5分鐘,棄上清。 組織細胞:將組織塊用剪刀剪成盡量小的小塊后,用0.25%的 胰酶消化0.5-1個小時。經過200-400目篩網過濾得到單細胞懸液。 1000 g離心5分鐘,棄上清,沉淀用1 ml預冷的PBS重懸。再次 1000 g離心5分鐘,棄上清。 注意,最后一次離心,棄上清后留50 μl上清,渦旋混勻。
                2、細胞固定 細胞沉淀用1 ml -20 ℃預冷的75%乙醇輕輕混勻,4℃固定2小 時以上或者過夜。然后,1000 g離心5分鐘,輕輕棄上清,沉淀用1 ml預冷的PBS重懸,1000 g離心5分鐘,棄上清。
                3、染色 PI染色工作液配置: 0.5 ml染色緩沖液(C液)中加入25μl PI 染液(A液)和10 μl RNase A(B液),混勻待用。每個細胞樣品 加入0.5 ml配置好的PI染色工作液,輕輕混勻重懸細胞。37℃,避 光孵育30分鐘,直接上流式細胞儀檢測(5小時內完成為佳)。激 發波長為488 nm,檢測紅色熒光。 注意:每個檢測細胞數不超過1×106個。
                注意事項
                1、PI具有毒性,操作時應注意防護,保護眼睛、避免吸入、并戴一次性手套。
                2、PI存在淬滅現象,保存和使用過程中注意避光。
                基本信息
                別名
                PI細胞周期與凋亡試劑盒
                儲存/保存方法
                -20 ℃避光保存,有效期12個月。
                溫馨提示:本產品僅作科研實驗使用,不支持臨床等研究


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                地址:上海市浦東新區新浩路58號申江科創園18棟
                郵箱:chenjw@absin.cn
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