纖維蛋白酶；9002-04-4

產品描述：

纖維蛋白酶（Thrombin）來源于牛血漿，分子量37KD，是由兩條肽鏈（31KD和6KD）通過二硫鍵組成的。Thrombin是蛋白質水解酶，其催化纖維蛋白原（Fibrinogen）水解掉A肽和B肽，由此形成纖維蛋白單體，單體進一步聚合，在血小板、紅細胞和白細胞等參與下形成血凝塊。

6、性價比及其突出，尤其對于工業客戶，國內產品的價格，國際頂尖產品質量。

來源：牛血漿

純度：2000U/mg

使用方法：

（一）融合蛋白切割由于Thrombin具有切割序列專一性強，水解效率高的特點，它被廣泛地應用于基因工程產品的開發，其應用之一是作為工具蛋白酶用于重組融合蛋白質的特異性斷裂，尤其適用于生物工程制藥業及基因工程、生物化學、分子生物學等研究。 Thrombin是一種廣泛用于切割標簽的蛋白酶，能夠有效切質量比僅為1:2000的蛋白。切割可在20℃到37℃之間切割0.3到16小時。Thrombin最佳的切割位點是X4-X3-P-R[K]-X1'-X2',這里X4 和 X3 是疏水氨基酸而X1'和 X2'是非酸性氨基酸，一些經常使用的識別位點是L-V-P-R-G-S,L-V-P-R-G-F,和MY-P-R-G-N。在X4-X3-P-R-G-X2'之間切割比在X4-X3-P-K-L-X2'更有效。其他識別位點是 X2-R[K]-X1', 例如A-R-G和G-K-A，這里切割發生在第二個殘基后。有效的消化緩沖液是20mM Tris-HCl緩沖液,含150mM氯化鈉,pH8.0。Thrombin可從切割產物中用p-氨基瓊脂糖親和純化,或者苯甲脒瓊脂糖移去。

（二）血小板聚集試驗 Thrombin與血小板表面的Thrombin受體結合，活化血小板，使血小板粘附和聚集。 血小板聚集實驗參照文獻：兔血用塑料管收集和用ACD(86 mmol／L檸檬酸鈉，111 mmol／L葡萄糖，53 mmol／L檸檬酸)0.15體積比抗凝，200 g離心10 min，離心2次，取上清，800g離心15 min。沉淀中加Tyrode—Hepes緩沖液(140 mmol／L NaCl，5 mmol／L KCl，1 mmol／L MgCl2，10 mmol／L Hepes，10mmol／L葡萄糖，pH 7.4)調節至血小板數為(3～4)×1011／L。血小板聚集用血液凝集儀來測定。血小板懸液(0.2ml )與藥物溫育1 min，然后用Thrombin(500 u／L)作用5 min，記錄聚集情況。

技術指標：

儲備溶液可在0.1%（w/v）BSA溶液中以100單位/ml的濃度制備。儲備溶液在0–5°C下保持活性一周。由于Thrombin溶液吸附到玻璃上，因此建議將溶液等份放入塑料管中，并在-20°C下儲存，以便長期儲存。

BSA使用水或PBS配置溶液