Human VEGF ELISA Kit

檢測原理：

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附檢測技術。特異性抗人VEGF抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和生物素化的檢測抗體，經過孵育，樣本中存在的VEGF與固相抗體和檢測抗體結合，形成免疫復合物。洗滌去除未結合的物質后，加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后，加入顯色底物，避光顯色。加入終止液終止反應，在450 nm波長(參考校正波長540nm或570nm)測定吸光度值。

檢測類型：雙抗夾心法

形式：預包被96孔板

檢測樣本類型：細胞上清液，血清，血漿

上樣量：100ul

試劑盒組分：

預包被96孔板、標準品、VEGF檢測抗體、稀釋用緩沖液、顯色液（A、B）、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說明書一份。

靈敏度：7.8pg/mL

檢測范圍：31.2 - 2,000 pg/mL

回收率范圍：113-135%

保存方法：2-8℃

標準曲線圖

背景：

血管內皮生長因子（VEGF或VEGF-A）又叫血管通透因子，是一種針對胎兒和成人的血管新生和血管生成的有效調節因子。血管內皮生長因子屬于PDGF家族，該家族蛋白的特點是在胱氨酸結和通過反向平行二硫鍵結合的二聚體的結構處，存在8個保守的胱氨酸殘基。經過選擇性剪切和氨基酸的序列長度，人類表達不同的亞型，包括：VEGF121、VEGF145、VEGF165、VEGF183、VEGF189和VEGF206等等。其中VEGF165是表達量高的一種亞型，其次是VEGF121和VEGF189。除了VEGF121，其它的亞型都包含了基本的肝素結合區域且不能自由擴散。人類的VEGF165與小鼠和大鼠的相應的蛋白氨基酸序列同源性為88%。VEGF在各種細胞和組織中表達，包括骨骼肌細胞和心肌細胞、肝細胞、成骨細胞、中性粒細胞、巨噬細胞、角質形成細胞、棕色脂肪細胞、CD34+干細胞、內皮細胞、成纖維細胞、血管平滑肌細胞等等。VEGF的表達收到缺氧和細胞因子的誘導，包括IL-1、IL-6、IL-8、抑瘤素M和腫瘤壞死因子α等。在發育過程和成體中，VEGF的表達量也是不同的。

VEGF的二聚體與2個相關的酪氨酸激酶受體相結合，即VEGF R1（也叫Flt-1）和VEGF R2（Flk-1/KDR）。VEGF同時可以誘導后者的同型二聚體和自磷酸化過程。這些受體擁有7個胞外的免疫球蛋白的域和一個胞內分開的酪氨酸受體域。血管內皮細胞和其它一些非內皮細胞都表達VEGF受體。盡管VEGF與VEGF R1的親和力高，但VEGF R2卻是調控VEGF的血管生成的主要因子。VEGF165也結合臂板蛋白（semaporin）受體，神經纖毛蛋白1（neuropilin-1），由此促進與VEGF R2的復合體形成。

VEGF因其參與血管生成而著稱。在胚胎發育過程中，VEGF調控內皮細胞的增殖、遷移和生存，并由此調控血管的密度、體積；但對于血管形成的格局并不起作用。VEGF通過成骨細胞和軟骨細胞的招募促進骨骼的形成，它同時也是一個單核細胞趨化因子。在產后，VEGF維持血管內皮細胞的完整性，并且是大/小血管內皮細胞的有效絲裂原。在成體中，VEGF主要在傷口修復和女性的生殖周期發揮作用。在疾病組織當中，VEGF促進血管的通透性。因此，VEGF通過外滲和腫瘤血管生成參與了腫瘤的轉移過程。針對阻斷VEGF活性的各種治療策略正在被用于控制由VEGF誘導的腫瘤血管生成。體內循環的VEGF水平與自身免疫性疾病（如類風濕關節炎、多發性硬化癥、系統性紅斑狼瘡等）的病癥程度相關。