Human IL-10 ELISA Kit

檢測原理：

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附檢測技術。特異性抗人IL-10抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和生wu素化的檢測抗體，經過孵育，樣本中存在的IL-10與固相抗體和檢測抗體結合，形成免疫復合物。洗滌去除未結合的物質后，加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后，加入顯色底物，避光顯色。加入終止液終止反應，在450 nm波長(參考校正波長540nm或570nm)測定吸光度值。

檢測類型：雙抗夾心法

形式：預包被96孔板

檢測樣本類型：細胞上清液，血清，血漿

上樣量：100ul

試劑盒組分：

預包被96孔板、標準品、IL-10檢測抗體、稀釋用緩沖液、顯色液（A、B）、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說明書一份。

靈敏度：3.9pg/mL

檢測范圍：31.2 - 2,000 pg/mL

回收率范圍：88-110%

保存方法：2-8℃

標準曲線圖

背景：

人白細胞介素10（IL-10），又稱為細胞生長因子合成抑制因子（CSIF），是IL-10α螺旋家族的成員，該家族還包括IL-19、IL-20、IL-22、IL-24和IL-26/ak155。IL-10可由多種活化的造血細胞、肝星狀細胞、角質形成細胞和胎盤滋養葉細胞分泌。人類IL-10對小鼠細胞有活性，而小鼠IL-10不能作用于人的細胞。成熟的人IL-10與馬IL-10有86%的氨基酸序列同源性，與牛、犬、貓、豚鼠、小鼠、綿羊、豬和大鼠IL-10的同源性在72-80%之間。它包含兩個鏈內二硫鍵，以非共價結合的同源二聚體形式表達，分子量36kDa。

IL-10通過由II型細胞因子IL-10受體亞基α和β異源二聚體復合物介導其生物活性。IL-10受體α亞基是一個110kDa的跨膜糖蛋白，主要表達于淋巴細胞、NK細胞、巨噬細胞、單核細胞、星形膠質細胞、腸上皮細胞、滋養層細胞和活化的肝星狀細胞，而75kDa的跨膜受體β則廣泛表達。IL-10二聚體結合兩個IL-10 Rα鏈，激發兩個IL-10 Rβ鏈的加入。IL-10 Rβ不直接結合IL-10，但為信號轉導所需要。IL-10 Rβ還與IL-20 Rα、IL-22 Rα1及IL-28 Rα形成IL-22、IL-26、IL-28和IL-29的受體復合物。

IL-10參與的免疫調節包括抑制作用和刺激作用。它通過抑制Th1細胞和Th17細胞的擴增和活化，促進M2型巨噬細胞發揮抗炎作用。免疫調節T細胞（Treg）和調節性B 細胞對IL-10表達的調節對Treg增殖有重要意義。然而，在腫瘤環境中，IL-10抑制Treg及髓源性抑制細胞的增殖。IL-10誘導CD8 T細胞在腫瘤中的積累和活化。IL-10通過限制關節炎的組織損傷，促進肌肉損傷后再生發揮保護作用，但它可能導致病毒感染的持久性。IL-10水平在干燥綜合征（唾液）、原發性中樞神經系統淋巴瘤（腦脊液）、卵巢癌（血清和腹水）中升高。其水平在心臟病復發或子嫻前期患者血清和男性不育患者精液中降低。

IL-1α和IL-1β是結構相關的多肽，在氨基酸水平約有25%的同源性。兩者都是先合成為31kDa前體，然后裂解為大約17.5kDa的成熟蛋白。由Caspase-1/ICE對IL-1β的前體切割是炎癥反應的關鍵步驟。盡管IL-1α和IL-1β都不含有一個典型的疏水信號肽，但有證據表明，它們可以經非經典途徑分泌到胞外。未處理的IL-1α部分可在細胞膜上展示，并可能保留生物活性。與IL-1β前體不同，IL-1β前體與成熟的IL-1β相比，具有很少或根本不具有生物活性。IL-1β前體與成熟的IL-1β都運至胞外。

IL-1α和IL-1β通過免疫球蛋白超家族受體與IL-1RA結合發揮其效應。80kDa的I型跨膜受體（IL-1RI）在多種細胞中表達，包括T細胞、成纖維細胞、角質形成細胞、內皮細胞、滑膜襯里細胞、軟骨細胞和肝細胞。68kDa的II型跨膜受體（IL-1RII）在B細胞、中性粒細胞和骨髓細胞中表達。IL-1RI和IL-1RII的胞外區域享有28%的同源性。但其他區域有顯著不同：II型受體的胞內域只有29個氨基酸，而I型受體的胞內域有213個氨基酸。IL-1RII似乎對IL-1信號沒有響應，其功能是作為誘騙受體從而削弱IL-1的作用。IL-1受體配體蛋白（IL-1RAcP）與IL-1RI相互作用是IL-1RI信號傳導所必需的。IL-1RA是分泌型分子，是IL-1的競爭性抑制劑。可溶性IL-1RI和IL-1RII存在于人的血漿、關節液、及幾種細胞株的條件培養基中。此外，牛痘病毒編碼類似于可溶性IL-1RII的IL-1結合蛋白。