激動(dòng)劑抑制劑的特性
更新時(shí)間：2017-11-06 點(diǎn)擊次數(shù)：1878
激動(dòng)劑抑制劑原理,酶具有高度專一性，一種酶只能催化一種或一類底物發(fā)生反應(yīng)，如淀粉酶只能水解淀粉，不能水解蔗糖。當(dāng)?shù)矸郾坏矸勖?水解為還原性麥芽糖和葡萄糖時(shí)，能使班氏試劑的Cu還原成Cu，生成磚紅色Cu2O沉淀。淀粉酶的活性受溫度、pH、激動(dòng)劑及抑制劑、酶濃度以及作用時(shí)間等多種因素影響，因而水解淀粉生成一系列分子大小不同的糊精。不同程度的水解糊精可與碘反應(yīng)生成紫色、棕色或紅色絡(luò)合物。通過(guò)上述特征性反應(yīng)，并以蔗糖等作對(duì)照，便可觀察、驗(yàn)證淀粉酶是否具有專一性以及它的催化活性是否受到影響.
激動(dòng)劑抑制劑操作方法,唾液淀粉酶的收集與處理.制備唾液,實(shí)驗(yàn)者先將痰咳盡，用自來(lái)水漱口，以清除口腔內(nèi)食物殘?jiān)僭诳谇粌?nèi)含蒸餾水約15ml，并作咀嚼咕漱運(yùn)動(dòng)，3分鐘后吐入墊有兩層經(jīng)潤(rùn)濕處理的脫脂紗布的漏斗內(nèi)，過(guò)濾于小燒杯中備用，為與下面稀釋唾液相區(qū)別，此稱制備唾液.煮沸唾液,取上述唾液約2ml，盛入1中號(hào)試管中,置沸水浴煮沸5分鐘備用.稀釋唾液,調(diào)整唾液淀粉酶活性，使之在pH6.8、37℃和既無(wú)激動(dòng)劑又無(wú)抑制劑條件下，作用5min，水解淀粉至紅色糊精為宜。
激動(dòng)劑抑制劑具體做法是取12凹白瓷反應(yīng)板一塊,第1排每凹各加1滴制備唾液，12、13、14凹分別加生理鹽水1、2、3滴，用滴管采用抽吸法，由稀到濃（14→12）小心混勻各凹，勿使濺入相鄰凹中.每混勻一凹便取其1滴放入同列的2排凹中，剩余稀釋唾液應(yīng)全部放回原凹中.在盛有不同稀釋度唾液的第2排各凹中，均加入4滴緩沖液（pH6.8），2滴1%的淀粉液和2滴蒸餾水，用①混勻法充分混勻，置37℃下5min.在第2排各凹中加I液一滴，混勻，觀察比較各凹顏色，以淺棕-紅色對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)，用生理鹽水稀釋3ml制備唾液備用.唾液淀粉酶的專一性以及溫度、pH、激活劑和抑制劑對(duì)唾液淀粉酶活性影響的觀察.
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