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                做好這些,讓基質膠流暢到底

                更新時間:2025-03-18      點擊次數:258

                一、收到貨后請檢查

                 

                1、泡沫箱內是否有干冰

                2、基質膠是否呈固態,膠面是否平整;

                3、基質膠的顏色是否在正常范圍內(不含酚紅為白色/乳白色,含酚紅為:黃色-粉紅色-深紅色,由溫度變化決定);

                4、收到貨后如果不是立刻使用基質膠,應立即將其放進-20/-80℃冰箱長期保存。

                 

                二、操作流程說明

                 

                每次使用基質膠前,應嚴格按照以下基質膠操作流程說明進行解凍操作!!!

                 

                1、提前在-20℃下預冷“基質膠冰盒(abs7289)“(或者準備碎冰)和200μL槍頭1個小時以上,在傍晚下班前將基質膠從-20/-80℃冰箱取出并放入“基質膠冰盒“(或將基質膠埋于鋪滿碎冰的冰盒)中,然后再將整個冰盒一起放入4℃冰箱進行過夜解凍

                2、第二天,解凍完成后可進行基質膠使用。將基質膠從4℃冰箱取出,立即放入-20℃預冷的“基質膠分裝冰盒"(碎冰盒)中,隨后在超凈操作臺/生物安全柜中進行無菌使用;

                3、使用時,取出-20℃預冷的200μL槍頭,并打開基質膠瓶蓋(盡可能保證基質膠瓶在基質膠解凍冰盒上操作);

                4、使用基質膠,立即放回冰盒,置于4℃冰箱短期保存即可,兩周內使用完畢。

                 

                三、必讀的注意事項

                 

                1、實驗人員的手心不要直接地接觸基質膠部分;

                2、整個使用過程都要在預冷的基質膠分裝冰盒(碎冰盒)上進行,該次實驗用不完的基質膠可以放在4℃至多保存兩周

                3一定不要將基質膠直接丟在冰箱中解凍和保存,一定要放在“基質膠冰盒“(或將基質膠埋于鋪滿碎冰的冰盒)中再放入4度冰箱解凍或保存;此外,不要放在冰箱門邊解凍或保存,也不要放在經常敞開口取放試劑的冰箱解凍或保存,盡可能放在4度冰箱靠里面/抽屜內/出冷風口處解凍或保存;

                4由于基質膠對溫度敏感,故建議使用非除霜型且溫度穩定的冰箱進行融解、保存,請一定不要在帶有自動除霜的冰箱中解凍基質膠;

                5如使用碎冰盒過夜解凍,應固定好基質膠瓶位置,確保過夜碎冰融化后基質膠瓶不會傾倒,冰水不會浸沒基質膠瓶口

                6基質膠使用過程應避免反復凍融

                7液體基質膠會在8℃以上快速成膠(特別是高濃度基質膠)。因此,使用時,接觸到基質膠的耗材必須預冷(如移液管、吸頭、EP管等),并且整個實驗必須在無菌、冰上操作

                8使用時的基質膠在冰上應呈現液態,若在冰上使用時基質膠已經凝固,說明分裝操作未能保持低溫,導致基質膠已經成膠,不宜再使用;

                9如果發現放置在4度冰箱中基質膠很粘稠,但還是液態,可以將其放入一個-20預冷的冰盒中,放入-20℃冰箱靜置3-5min,流動性一般都會恢復正常;如果不能恢復,則可能為冰箱溫度太高導致凝膠,建議不要使用。

                 

                、Q&A

                 

                Q1:為什么我的基質膠很粘稠?

                 

                A1:基質膠的蛋白濃度越高,膠體越粘稠。如果濃度高于13.0mg/mL,基質膠會顯得非常濃稠。基質膠產品在未稀釋前都會比較粘稠。粘稠的高濃度基質膠不稀釋也可以直接使用,如用于培養腫瘤細胞和/或血管生成因子,注射于小鼠體內后,細胞可以保持原位,便于原位分析和/或以后的切除;或者稀釋后,按照標準濃度的基質膠產品使用方法使用,具體稀釋濃度根據實驗需求確定。

                 

                A2:除因為產品本身濃度高而粘稠外,基質膠的狀態還與運輸過程中溫度的變化和儲藏條件有關。整個運輸過程中必須使用干冰運輸。如果儲藏基質膠的冰箱帶有自動除霜功能,冰箱除霜過程中升溫,可能使基質膠成膠。所以,切忌將基質膠儲藏于此類帶有自動除霜冰箱中。為保證基質膠的使用效果,凍融次數應該盡可能減少。特別注意:水的溫度傳遞、冰的溫度傳遞、冰水的溫度傳遞和空氣的溫度傳遞不同,空氣溫度傳遞特別慢和溫度分布不均一,因此基質膠解凍不能直接丟在2-8度冰箱解凍,一定要放在冰/冰水混合物中,再放入0-4的冰箱解凍。


                 

                今天講解就到這了,大家如有實驗問題,歡迎一起交流哦!

                  

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