探索腫瘤微環境中的免疫堡壘：三級淋巴結構TLS的研究應用

在癌癥的復雜世界中，免疫系統與腫瘤細胞之間的斗爭是一場精細而微妙的戰爭。近年來，科學家們發現，在腫瘤微環境中，一種特殊的免疫結構——三級淋巴結構(Tertiary Lymphoid Structures, TLS)在這場戰爭中扮演著至關重要的角色。本文將帶您深入了解TLS的神秘面紗，以及它在癌癥治療中的研究應用。

什么是TLS？

TLS是腫瘤組織內部自發形成的類似淋巴組織的免疫結構，它們在腫瘤微環境中充當局部免疫反應的熱點。TLS由多種免疫細胞組成，包括T細胞、B細胞、樹突狀細胞等，它們共同協作，對腫瘤細胞進行監視和攻擊。

TLS與腫瘤免疫的關系

研究表明，TLS的存在與腫瘤患者的臨床結果密切相關。在某些癌癥類型中，TLS的高密度與更好的預后和對免疫療法的響應性有關。它們通過促進腫瘤特異性T細胞的激活和增殖，增強了對腫瘤的免疫監視。

TLS在癌癥治療中的應用

1、預后評估：通過分析腫瘤組織中TLS的數量和成熟度，醫生可以更準確地預測患者的預后，為治療決策提供依據。

2、免疫治療的生物標志物：TLS的特定特征，如B細胞和T細胞的分布，可以作為免疫檢查點抑制劑治療反應的預測指標。

3、新療法的開發：對TLS的研究有助于開發新的癌癥免疫療法，例如通過促進TLS的形成和功能來增強腫瘤微環境的免疫反應。

研究進展

新的研究，如發表在《Nature Communications》上的文章《Tertiary lymphoid structures and B cells determine clinically relevant T cell phenotypes in ovarian cancer》，深入探討了TLS在卵巢癌中的免疫調節作用。研究團隊利用空間轉錄組學、多重熒光免疫組化(mIHC)和流式細胞術等先進技術，揭示了TLS在腫瘤內部的分布特征和它們對T細胞表型的影響。接下來小愛就來和大家一塊解讀一下這篇文獻~

這篇文獻的標題是《Tertiary lymphoid structures and B cells determine clinically relevant T cell phenotypes in ovarian cancer》，發表在《Nature Communications》上。以下是文獻的主要要點以及應用到的多色技術分析：

1、研究背景：

腫瘤內部的三級淋巴結構(Tertiary Lymphoid Structures, TLS)與癌癥患者的臨床結果改善有關，反映了它們在發展針對腫瘤的免疫反應中的作用。

2、主要發現：

1）在高級別漿液性卵巢癌(High-Grade Serous Ovarian Carcinoma, HGSOC)中，成熟的TLS(mTLS)只出現在16%的病例中，并且與腫瘤突變負擔(Tumor Mutational Burden, TMB)相對較高的情況相關。

2）mTLS與腫瘤內部CD8+效應T細胞(TEFF)密度增加有關，特別是與TIM3+PD1+的CD8+ T細胞，這些細胞對免疫檢查點抑制劑(Immune Checkpoint Inhibitors, ICIs)較為敏感。

3、免疫微環境差異：

與非小細胞肺癌(Non-Small Cell Lung Carcinoma, NSCLC)相比，HGSOC與較低的濾泡輔助T細胞(Follicular Helper T Cells, TFH)密度相關，因此發展出數量有限的mTLS，可能不足以維持對ICI敏感的TCF1+PD1+ CD8+ T細胞表型。

4、研究意義：

研究結果指出了mTLS在對ICI敏感與不敏感的腫瘤中的關鍵數量和質量差異，這可能指導為HGSOC患者開發替代免疫療法。

5、 結論：

TMB與TLS的形成在HGSOC患者中相關聯，盡管HGSOC的TMB通常被認為是低到中等水平。研究結果表明，TLS的形成和成熟程度影響腫瘤內部T細胞的表型和功能特性。

圖源：Nature Communications | (2024) 15:2528

這張圖片是文獻中用于展示卵巢癌中三級淋巴結構(Tertiary Lymphoid Structures, TLS)的臨床相關性。

A：展示了不同數量TLS的腫瘤組織切片的免疫熒光圖像，包括CD4、CD8、CD20、CD21、CD23、DC-LAMP和GZMB等標記物的染色，以識別不同類型的免疫細胞和TLS的結構。

B：顯示了209名HGSOC患者中早期TLS(eTLS)和成熟TLS(mTLS)的分布情況，根據TLS的數量，患者被分為不同的組，以評估TLS數量與臨床結果之間的關系。

C：TLS與疾病階段的關系--展示了不同病理疾病階段(I+II和III+IV)的HGSOC患者中eTLS和mTLS的分布，可以看到eTLS在早期HGSOC中更豐富，而mTLS的分布與疾病階段無關。

D和E：免疫細胞的空間共定位--展示了TLS與不同類型的免疫細胞（如T細胞、細胞毒性T細胞、記憶B細胞、樹突狀細胞等）的空間共定位情況，以評估細胞類型在TLS不同成熟狀態下的豐度。 

F：免疫細胞密度--展示了在非TLS區域(nTLS)、eTLS和mTLS區域內DC-LAMP+ DCs、CD20+ B細胞、CD8+ T細胞和GZMB+CD8+ T細胞的密度，數據以箱線圖的形式展示，包括zui低四分位數、中位數、zui高四分位數和極值。

G：Cox分析--展示了CD8+ T細胞、GZMB+CD8+ T細胞、DC-LAMP+ DCs和CD20+ B細胞在不同區域的密度與患者總體生存(OS)之間的關系，使用Cox比例風險模型進行了單變量分析，顯示了風險比(Hazard ratio)和p值。

H：總體生存曲線--根據CD8+ T細胞、GZMB+CD8+ T細胞和CD20+ B細胞在nTLS區域的密度，將患者分為高密度和低密度兩組，并展示了它們的生存曲線，使用Kaplan-Meier方法估計生存曲線，并通過log-rank測試評估組間差異。

多重熒光免疫組化實驗服務

TLS作為腫瘤免疫微環境中的關鍵結構，其研究不僅增進了我們對腫瘤免疫機制的理解，也為癌癥的診斷和治療提供了新的思路和方法。愛必信多色實驗服務可以使用HALO軟件進行定量評估分析腫瘤微環境中特定免疫細胞群體的密度，分析腫瘤樣本中的早期TLS(eTLS)和成熟TLS(mTLS)。

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[2] The diapause-like colorectal cancer cells induced by SMC4 attenuation are characterized by low proliferation and chemotherapy insensitivity IF:29

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[5] The thermogenic activity of adjacent adipocytes fuels the progression of ccRCC and compromises anti-tumor therapeutic IF：27.28

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[10] Reciprocal costimulatory molecules control the activation of mucosal type 3 innate lymphoid cells during engagement with B cells PMID：37225838 IF：24.1

[11] Caveolin-1 is critical for hepatic iron storage capacity in the development of nonalcoholic fatty liver disease IF：21.1

[12] Lymphocyte infiltration and thyrocyte destruction are driven by stromal and immune cell components in Hashimoto’s thyroiditis IF：17.69

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