Jurkat（Clone E6-1）細胞培養(yǎng)攻略

Jurkat（Clone E6-1）概述：

Jurkat（Clone E6-1）細胞，人T淋巴細胞白血病細胞，是肯德爾·史密斯博士將Jurkat細胞在41°C孵育48h，于巨噬細胞上進行有限稀釋克隆得到的，Jurkat（Clone E6-1）細胞是從14歲男性急性T細胞白血病患者的外周血建立的。在用佛波酯和針對T3抗原的凝集素或單克隆抗體刺激后產(chǎn)生大量的IL-2（需要兩種刺激物誘導(dǎo)IL-2的產(chǎn)生）。可用于免疫系統(tǒng)疾病研究、免疫學(xué)和免疫腫瘤學(xué)研究，該細胞株克服了Jurkat細胞系建立初期易被支原體污染的缺點。

圖 Jurkat細胞系譜

Jurkat（Clone E6-1）基本信息：

圖 Jurkat（Clone E6-1）形態(tài)圖

Jurkat（Clone E6-1）換液方法：

補液法：培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基變黃，則補加適量的新鮮培養(yǎng)基（1-2mL左右），補充2-3次后，1200rpm （約250g）3min，全部離心，棄上清，將細胞沉淀重懸于新的培養(yǎng)基中；

半換液法：豎起培養(yǎng)瓶靜置一段時間（10min左右），待細胞沉入底部，小心吸出約一半的培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)移到離心管離心，若有細胞沉淀，用少量培養(yǎng)基重選后再移入培養(yǎng)瓶，培養(yǎng)瓶瓶補充新鮮培養(yǎng)基；

注意：上述過程中若發(fā)現(xiàn)細胞密度超過1×10⁶ cells/mL則考慮換液，建議細胞密度保持在1×10⁵-1×10⁶cells/mL, 細胞密度不可超過3×10⁶/mL。

圖 半換液示意圖

培養(yǎng)要點：

1、該細胞受密度影響較大，低密度時細胞生長速度較慢，接種和培養(yǎng)時注意細胞密度；
2、Clone E6-1復(fù)蘇后有時需要5-7d才能恢復(fù)到凍存前的狀態(tài)，前兩天勿對其進行操作；
3、建議凍存密度提高到2-3×10⁶/mL，凍存率可達到70%左右；
4、若發(fā)現(xiàn)較大細胞團，可用槍頭輕微吹散，切勿用力過度，對其產(chǎn)生機械刺激。

Jurkat（Clone E6-1）的應(yīng)用：

1、Jurkat（Clone E6-1）已被廣泛用作TCR信號通路的遺傳和生化分析的有力工具；

2、Jurkat和Jurkat（Clone E6-1）都可用于成像研究，以確定超抗原特異性結(jié)合物中免疫突觸（IS）組裝的關(guān)鍵；

圖 E6.1 LFA-1high和Raji細胞(APC)的15min綴合物進行免疫熒光分析

3、Jurkat細胞模型已廣泛應(yīng)用于T細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細胞因子和受體的表達, 以及各類感染性疾病的治療和機制研究中, 如HIV、EB、丙型肝炎等病毒的感染研究，其實驗結(jié)果可作為人周圍血淋巴細胞培養(yǎng)實驗的基礎(chǔ)研究和前期實驗。

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*本文圖片來源于網(wǎng)絡(luò)，僅供學(xué)習(xí)參考用

[1] Cassioli C, Balint S, Compeer EB, et al. Increasing LFA-1 Expression Enhances Immune Synapse Architecture and T Cell Receptor Signaling in Jurkat E6.1 Cells. Front Cell Dev Biol. 2021;9:673446. Published 2021 Jul 23. doi:10.3389/fcell.2021.673446
[2] Chen JL, Nong GM. [Advances in application of Jurkat cell model in research on infectious diseases]. Zhongguo Dang Dai Er Ke Za Zhi. 2018 Mar;20(3):236-242. Chinese. doi: 10.7499/j.issn.1008-8830.2018.03.014. PMID: 29530126; PMCID: PMC7389782.
 

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