Jurkat（Clone E6-1）細胞培養攻略

Jurkat（Clone E6-1）概述：

Jurkat（Clone E6-1）細胞，人T淋巴細胞白血病細胞，是肯德爾·史密斯博士將Jurkat細胞在41°C孵育48h，于巨噬細胞上進行有限稀釋克隆得到的，Jurkat（Clone E6-1）細胞是從14歲男性急性T細胞白血病患者的外周血建立的。在用佛波酯和針對T3抗原的凝集素或單克隆抗體刺激后產生大量的IL-2（需要兩種刺激物誘導IL-2的產生）。可用于免疫系統疾病研究、免疫學和免疫腫瘤學研究，該細胞株克服了Jurkat細胞系建立初期易被支原體污染的缺點。

圖 Jurkat細胞系譜

Jurkat（Clone E6-1）基本信息：

圖 Jurkat（Clone E6-1）形態圖

Jurkat（Clone E6-1）換液方法：

補液法：培養過程中發現培養基變黃，則補加適量的新鮮培養基（1-2mL左右），補充2-3次后，1200rpm （約250g）3min，全部離心，棄上清，將細胞沉淀重懸于新的培養基中；

半換液法：豎起培養瓶靜置一段時間（10min左右），待細胞沉入底部，小心吸出約一半的培養基，轉移到離心管離心，若有細胞沉淀，用少量培養基重選后再移入培養瓶，培養瓶瓶補充新鮮培養基；

注意：上述過程中若發現細胞密度超過1×10⁶ cells/mL則考慮換液，建議細胞密度保持在1×10⁵-1×10⁶cells/mL, 細胞密度不可超過3×10⁶/mL。

圖 半換液示意圖

培養要點：

1、該細胞受密度影響較大，低密度時細胞生長速度較慢，接種和培養時注意細胞密度；
2、Clone E6-1復蘇后有時需要5-7d才能恢復到凍存前的狀態，前兩天勿對其進行操作；
3、建議凍存密度提高到2-3×10⁶/mL，凍存率可達到70%左右；
4、若發現較大細胞團，可用槍頭輕微吹散，切勿用力過度，對其產生機械刺激。

Jurkat（Clone E6-1）的應用：

1、Jurkat（Clone E6-1）已被廣泛用作TCR信號通路的遺傳和生化分析的有力工具；

2、Jurkat和Jurkat（Clone E6-1）都可用于成像研究，以確定超抗原特異性結合物中免疫突觸（IS）組裝的關鍵；

圖 E6.1 LFA-1high和Raji細胞(APC)的15min綴合物進行免疫熒光分析

3、Jurkat細胞模型已廣泛應用于T細胞信號轉導、細胞因子和受體的表達, 以及各類感染性疾病的治療和機制研究中, 如HIV、EB、丙型肝炎等病毒的感染研究，其實驗結果可作為人周圍血淋巴細胞培養實驗的基礎研究和前期實驗。

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*本文圖片來源于網絡，僅供學習參考用

[1] Cassioli C, Balint S, Compeer EB, et al. Increasing LFA-1 Expression Enhances Immune Synapse Architecture and T Cell Receptor Signaling in Jurkat E6.1 Cells. Front Cell Dev Biol. 2021;9:673446. Published 2021 Jul 23. doi:10.3389/fcell.2021.673446
[2] Chen JL, Nong GM. [Advances in application of Jurkat cell model in research on infectious diseases]. Zhongguo Dang Dai Er Ke Za Zhi. 2018 Mar;20(3):236-242. Chinese. doi: 10.7499/j.issn.1008-8830.2018.03.014. PMID: 29530126; PMCID: PMC7389782.
 

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