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                HepG2細(xì)胞培養(yǎng)攻略

                更新時(shí)間:2023-03-02      點(diǎn)擊次數(shù):2334

                HepG2 細(xì)胞是來源于一個(gè)15歲白人的肝癌組織;分泌多種血漿蛋白:清蛋白、α2-巨球蛋白、血纖維蛋白溶酶原、轉(zhuǎn)鐵蛋白等;模式染色體數(shù)為55;該細(xì)胞在免疫抑制小鼠中不致瘤;是一個(gè)合適的轉(zhuǎn)染宿主;表達(dá)標(biāo)志物包括胰島素受體;胰島素樣生長(zhǎng)因子 II (IGF II)受體。呈上皮樣;貼壁,傳代比例 1:4 - 1:6;營(yíng)養(yǎng)體系是MEM+10% FBS。




                  名稱

                HepG2(人肝癌細(xì)胞)

                  形態(tài)

                上皮樣

                生長(zhǎng)特性

                貼壁;傳代比例 1:4 - 1:6

                營(yíng)養(yǎng)體系

                MEM(abs9503)+10% FBS(abs972)+1% PS(abs9244)



                圖1 HepG2 人肝癌細(xì)胞

                首先我們討論的是HepG2長(zhǎng)得怎么才算好呢?相比于其它細(xì)胞,HepG2長(zhǎng)得相對(duì)ugly一些,這個(gè)細(xì)胞狀態(tài)好的形態(tài)學(xué)表現(xiàn)有哪些?我們來看一組對(duì)比(圖3和圖4)。

                差的細(xì)胞特點(diǎn):細(xì)胞裂解,背景臟;

                好的細(xì)胞特點(diǎn):細(xì)胞克隆成島狀,背景干凈,對(duì)比是很鮮明的。




                接下來我們討論一下HepG2細(xì)胞消化問題。在體外培養(yǎng)時(shí),該細(xì)胞容易聚團(tuán)呈島狀(如圖4所示),且如果長(zhǎng)得過滿,輕度消化就成片下來,容易成團(tuán)。


                圖4 HepG2細(xì)胞聚團(tuán)增殖成呈島狀分布

                傳代時(shí),怎樣才能使HepG2消化成單個(gè)細(xì)胞?

                有兩種解決辦法:

                ※ 融合率達(dá)到80%即可傳代,長(zhǎng)太滿容易成片脫落;

                ※ 先用胰酶消化約3分鐘,用完培終止消化作用,然后用移液管將細(xì)胞懸液吸起,將管口稍微用力按在培養(yǎng)瓶底部,用力快速將細(xì)胞懸液擠出(可重復(fù)一次),可有效減輕細(xì)胞聚團(tuán)。

                HepG2是最為常用肝癌細(xì)胞系之一,主要用于肝臟研究

                肝炎病毒研究:HepG2是常用的研究HBV和HCV細(xì)胞系模型,利用CRISPR/Cas9構(gòu)建基因敲除HepG2的HBV感染細(xì)胞模型細(xì)胞,為治愈乙肝提供新思路。體外肝癌(HCC)模型:HepG2中p53抑癌基因無突變,因此可用于研究p53與肝細(xì)胞癌(HCC)的密切關(guān)系,以及HCC的發(fā)病、診治、預(yù)防。

                藥物研究:肝臟是人體內(nèi)藥物代謝的最主要器官,也是重要的解毒器官。HepG2細(xì)胞系無論在形態(tài)上還是功能上都更接近于人的肝組織,該細(xì)胞系常用于藥物代謝和肝毒性研究。

                本期講解就到這里了,下一期您想了解哪種細(xì)胞的培養(yǎng)攻略呢?歡迎留言評(píng)論哦。如有細(xì)胞培養(yǎng)問題,歡迎掃碼加入我們微信群哦。

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                α-MEM培養(yǎng)基

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                Ham's F-12K培養(yǎng)基

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                abs9561

                DMEM/F-12培養(yǎng)基

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                abs962

                PBS緩沖液

                500ml

                abs970

                D-PBS緩沖液(不含 Ca2+ Mg2+

                500ml

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                D-PBS緩沖液(含 Ca2+ Mg2+)

                500ml

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                Hanks平衡鹽溶液(不含 Ca2+ Mg2+)

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                abs9258

                Hanks平衡鹽溶液(含 Ca2+ Mg2+)

                500ml

                abs47014938

                胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%) ,含酚紅

                100ml

                abs47047375

                胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%),不含酚紅

                100mL

                abs9479

                無DMSO無血清細(xì)胞凍存液

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                細(xì)胞凍存液(含血清)

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                組織保存液

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                abs9480

                組織凍存試劑盒

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                abs44071148

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                500uL×4

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                培養(yǎng)箱除菌劑

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                abs9373

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                480ml

                 

                Absin特色產(chǎn)品線:
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