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                組織消化專題——酶的選擇

                更新時間:2023-02-07      點擊次數:1507

                酶解法作為單細胞懸液制備常用方法之一,通過利用特定酶進行相應的化學反應除掉一些特定結構,適合將小塊組織消化成為單個細胞。膠原酶是單細胞組織消化的重要酶種。膠原酶消化在單細胞樣本制備過程中,是不能缺少的一步。另外,組織解離常見的消化酶還有胰蛋白酶、脫氧核糖核酸酶Ⅰ、透明質酸酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、彈性蛋白酶,不同酶適用于不同的組織類型。

                 

                一、膠原酶

                膠原酶(Collagenase)主要水解結締組織中膠原蛋白成分。目前商用膠原酶是從溶組織梭狀細胞芽孢桿菌提取制備的,分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ等不同類型,要根據所要分離消化的組織類型選擇膠原酶類型。


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                abs47048000

                膠原酶Ⅰ

                用于上皮、肺,脂肪和腎上腺組織細胞的分離

                abs47048001

                膠原酶Ⅱ

                用于肝臟、骨、甲狀腺、心臟和唾液腺組織細胞的分離

                abs47048002

                膠原酶Ⅲ

                用于新生、腺體組織解離,需配合其它酶消化

                abs47048003

                膠原酶Ⅳ

                用于胰島初次分離制備

                abs47048004

                膠原酶Ⅴ

                用于胰腺小島組織的分離,將結締組織分離成單個細胞


                二、胰蛋白酶

                胰蛋白酶(Trypsin)為肽鏈內切酶,對精氨酸和賴氨酸肽鏈具有選擇性水解作用,可使天然蛋白、變性蛋白、纖維蛋白和黏蛋白等水解為多肽或氨基酸。胰蛋白酶可應用于肝、腎、甲狀腺等組織消化,需要配合其他蛋白酶如膠原酶或彈性蛋白酶一起使用。


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                abs47014938

                胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%) ,含酚紅

                100mL

                現貨

                abs47047375

                胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%),不含酚紅

                100mL

                現貨

                abs47014937

                胰蛋白酶消化液(0.25%) ,含酚紅

                100mL

                現貨

                abs47048223

                胰蛋白酶消化液(0.25%) ,不含酚紅

                100mL

                現貨

                 

                三、脫氧核糖核酸酶Ⅰ

                脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DeoxyribonucleaseⅠ, DNaseⅠ)一般用于酶法細胞分離實驗過程中,DNaseⅠ不會破壞細胞完整性。消化因細胞損傷釋放到溶液中的DNA,從而增加粘度和活力。


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                abs47047435

                脫氧核糖核酸酶Ⅰ(牛胰)

                100mg/500mg

                現貨

                 

                四、透明質酸酶

                透明質酸酶(hyaluronidase, HAase)是能使透明質酸產生水解作用酶的總稱,是一種能夠降低體內透明質酸的活性,從而提高組織中液體滲透能力的酶。常與膠原酶等天然蛋白酶聯合,用于解離結締組織。


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                abs47014926

                透明質酸酶

                100mg

                現貨

                1g

                1-2周

                 

                五、木瓜蛋白酶

                木瓜蛋白酶(Papain)用于細胞培養,在準備細胞培養液的第一步中被用于分離細胞。用酶處理小組織塊10分鐘后,就可以將連接細胞的細胞外基質打斷;然后再用蛋白酶抑制劑來停止反應,防止木瓜蛋白酶進一步裂解細胞本身。相較于胰蛋白酶、彈性蛋白酶,木瓜蛋白酶能講解大多數蛋白底物,常用作解離皮層神經元、視網膜、平滑肌等組織。


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                abs47014927

                木瓜蛋白酶

                25g

                現貨

                100g

                1-2周

                 

                六、中性蛋白酶

                中性蛋白酶(Dispase)也稱分散酶,來源于枯草桿菌,無支原體或其他動物病毒污染。具有比較溫和的蛋白水解酶活性,對細胞損傷小且可維持細胞膜完整性,因此非常適合用于分離原代和繼代細胞培養。中性蛋白酶還可用于消除懸浮細胞培養過程中發生的細胞聚集。常與膠原酶或其他蛋白酶結合使用。


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                abs47047496

                中性蛋白酶

                250g

                現貨

                 

                七、彈性蛋白酶

                彈性蛋白酶(Elastase),是豬胰腺來源的一種絲氨酸蛋白酶,催化蛋白和多肽水解(尤其是僅次于中性氨基酸殘基的肽鍵)。在所有蛋白酶中彈性蛋白酶非常特別的,因其能水解天然彈力素。在血液和細菌內都有發現彈性蛋白酶。研究發現,彈性蛋白酶很適合用來消化肺臟以分離肺泡II型細胞。


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                abs47014929

                彈性蛋白酶

                25mg

                現貨


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