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                WB——預制膠簡介

                更新時間:2021-10-26      點擊次數:7540

                蛋白電泳中*的一環就是配膠,常規配膠往往需要耗費數個小時的時間,還要面臨漏液、凝膠不均勻(微笑線)、氣泡(皺眉線)等等問題,甚至有時候為了制備一塊膠以獲得一張好看的電泳圖片,要多耗費幾天的時間;除了配制麻煩,原料試劑還有毒性,會對對配膠人員的身體造成危害。預制膠的出現,正是為了解決自己配膠存在的種種麻煩。

                 微笑線和皺眉線


                固定膠or梯度膠?

                8%、10%、12%、4-12%、4-20%......這其實指的是聚丙烯酰胺的濃度,不同濃度意味著對分離的蛋白分子量范圍的限制。前三者指的是固定濃度的預制膠,而后面二者則是梯度膠。
                凝膠梯度是通過梯度混合器形成的,高濃度的丙烯酰胺溶液首先加入到玻璃平板中,而后溶液濃度呈梯度下降,因此在凝膠的頂部孔徑較大,而在凝膠的底部孔徑較小。固定膠只能分離其分離范圍內的蛋白質,過大過小都不行,而梯度膠則不存在這種局限性,大分子在頂部分離,小分子在底部分離;由于梯度凝膠孔徑逐步變小,在蛋白質不能通透的孔徑附近對蛋白有濃縮作用,所以電泳后形成很窄的區帶,可以分辨出分子量相差較小的蛋白質,而這類蛋白往往在固定膠無法完成分離。


                Absin BIS-Tris Gels預制膠優勢:

                ▲ BIS-Tris Gels是一款高性能的小型聚丙烯酰胺凝膠,相比于傳統的Tris-Gly凝膠,Bis-Tris凝膠偏酸性,不容易降解,在4-25℃的條件下能夠長時間儲存
                ▲ 不含SDS,根據使用的電泳緩沖液類型可進行變性或非變性電泳實驗
                ▲ 含有1.5厘米高的4%濃縮膠,可以有效確保獲得非常銳利的條帶
                ▲ 膠板印有孔道標識,加樣更方便
                ▲ 電泳時間短,可支持150V電壓,30-45min即可完成電泳過程
                ▲ 邊緣效應弱,條帶更平直;相對于Tris-Glycine體系,Bis-Tris體系凝膠條帶位置正確性更高。
                ▲ 不用自行配制,開袋即用,安全省事便捷
                ▲ 避免丙烯酰胺毒害實驗人員可能性
                ▲ 批量生產,膠與膠間重復性好,質量穩定,避免手工灌膠的差異性

                 


                預制膠Q&A:

                Q:在使用過程中有哪些需要注意的地方?
                W:必須使用配套的MOPS/MES緩沖液,若使用其他體系的緩沖液,會造成條帶異常(本品贈送20×MOPS電泳液)
                Q:變性膠和非變性膠的區別是什么?
                W:變性膠與非變性的凝膠成分是一樣的,均不含SDS,兩者的區別在于變性膠的running buffer中含SDS, 而非變性膠的running buffer不含SDS,老師可以根據自己的需求配制變性或非變性的running buffer。
                Q:電泳時,分子量較小的marker和條帶分不開怎么辦?
                W:這個問題的原因是分離膠濃度較低造成的,不同濃度的分離膠分離范圍不同(見下圖),選用較高濃度的分離膠有助于小分子量條帶更加分散,便于觀察。

                蛋白分子量大小(KDa) 凝膠百分比(%)
                20-60 12
                25-85 10
                40-200 8
                20-200 4-12
                3.5-200 4-20


                Absin預制膠推薦:

                貨號 名稱 規格
                abs9380 BIS-Tris Gels 預制膠4-12%, 10 wells, 1.0 mm 10片/盒
                abs9381 BIS-Tris Gels 預制膠4-12%, 12 wells, 1.0 mm 10片/盒
                abs9382 BIS-Tris Gels 預制膠4-12%, 15 wells, 1.0 mm 10片/盒
                abs9383 BIS-Tris Gels 預制膠4-20%, 10 wells, 1.0 mm 10片/盒
                abs9384 BIS-Tris Gels 預制膠4-20%, 12 wells, 1.0 mm 10片/盒
                abs9385 BIS-Tris Gels 預制膠4-20%, 15 wells, 1.0 mm  10片/盒
                abs9386 BIS-Tris Gels 預制膠8%, 10 wells, 1.0 mm 10片/盒
                abs9387 BIS-Tris Gels 預制膠8%, 12 wells, 1.0 mm 10片/盒
                abs9388 BIS-Tris Gels 預制膠8%, 15 wells, 1.0 mm 10片/盒
                abs9389 BIS-Tris Gels 預制膠10%, 10 wells, 1.0 mm 10片/盒
                abs9390 BIS-Tris Gels 預制膠10%, 12 wells, 1.0 mm 10片/盒
                abs9391 BIS-Tris Gels 預制膠10%, 15 wells, 1.0 mm 10片/盒
                abs9392 BIS-Tris Gels 預制膠12%, 10 wells, 1.0 mm 10片/盒
                abs9393 BIS-Tris Gels 預制膠12%, 12 wells, 1.0 mm 10片/盒
                abs9394 BIS-Tris Gels 預制膠12%, 15 wells, 1.0 mm 10片/盒


                Absin特色產品線(全部現貨):
                WB相關:ECL發光液、預染marker、預制膠;IHC相關:二抗試劑盒、組化筆;IP/CoIP試劑盒;激動劑/抑制劑;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡試劑盒;呼吸爆發試劑盒;ELISA試劑盒;重組蛋白;抗體: 二抗、標簽抗體、對照抗體;定制服務(抗體/多肽/蛋白/標記/檢測)...

                 

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