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                ECL化學發光檢測試劑盒常見問題

                更新時間:2019-10-30      點擊次數:2523

                 愛必信熱賣單品ECL化學發光檢測試劑盒,靈敏度更高,背景更低,穩定性更好。常備現貨, 小編整理了ECL 的常見問題,助您的實驗更順利!

                 

                問題原因   方法
                白色條帶黑色背景體系中HRP過量   進一步稀釋HRP 標記
                膜上有棕色或黃色條帶
                背景發亮
                信號弱或無信號HRP過量,消耗底物   進一步稀釋HRP 標記
                抗原或抗體不足   增加抗體
                   使用超級ECL
                轉膜失敗   優化轉膜條件
                HRP 活性低   測試HRP 活性:暗室中,將1ul未稀釋的HRP 放入裝有1-2ml的基質工作
                   溶液的試管中。 幾分鐘內,溶液會立即發出藍光。
                高背景HRP過量,消耗底物   進一步稀釋HRP 標記
                封閉不充分或使用了不適當的封閉試劑   優化轉膜條件
                洗滌不充分   增加洗滌時間和次數
                膜過度曝光   減少曝光時間
                抗原、抗體 過量   減少抗體上樣量
                抗體特異性差   優化抗體特異性
                條帶有斑點轉膜失敗   優化轉膜條件
                x射線膠片與膜之間有氣泡   去除所有氣泡后,再曝光到膠片上
                背景有斑點形成聚合體   使用前通過0.2um過濾器過濾hrp -偶聯物
                電泳轉移過程中溫度過高   控制電泳和轉移過程中的溫度
                非特異性條帶HRP-偶聯物過量   進一步稀釋hrp -偶聯物
                SDS導致非特異性蛋白結合   在免疫檢測過程中不要使用SDS
                抗體特異性差   優化抗體特異性

                 

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