【推薦】蛋白marker精彩問答

在WB過程中，分子量Marker就像個螺絲釘一樣，只是個小細節，然而就是這樣一個小細節對實驗結果有著不可忽視的作用。這個WB參照家族的一員的作用主要是用來指示蛋白條帶所對應的分子量大小，只有標準量無誤了，實驗結果才有說服力，除此之外，蛋白標準還有表示轉移成功或者蛋白在凝膠上的電泳程度等等的作用，所以選擇正確的蛋白Marker也是WB實驗成功的必要條件之一。 本篇討論Western Blot實驗中關于蛋白Marker的常見問題分析，有助于成功完成WB。

Q：預染蛋白Marker是什么？有何用途？

A：預染蛋白Marker是一些純化好的蛋白，通過與染料共價耦聯后混合而成。在電泳過程中或者轉膜時可以直接觀察到。預染蛋白Marker的出現方便了我們的實驗，這種蛋白Marker可以幫助我們在電泳時、電泳后，以及轉膜后監測電泳情況和估計遷移率——比如，已知垂直電泳*分辨區域大約在膠的2/3處，如果使用預染Marker就可以預測目標蛋白進入*分辨區時停止電泳以得到*分辨效果;如果觀察到Marker電泳異常也可以及時終止電泳;另外在Western Blot轉膜以后可以直接觀察蛋白轉膜是否*，還可以在膜上標記蛋白分子量。所以越來越受到使用者的熱捧。

Q：蛋白Marker為什么跑的條帶不清楚？

A：原因很多哦，首先確認膠的濃度、PH值，離子強度是不是正常，這些都會影響條帶的質量。其次確定電泳液的PH、離子強度是否正確，如甘氨酸濃度太低時，蛋白會濃縮不好；電泳液新鮮配制。

其次，確認蛋白Marker是否降解或者染料是否脫落。absin生產的預染蛋白Marker采用*的技術，能保證染料不會從蛋白上脫落。且經過試驗證實，預染蛋白Marker能在4°C保存3月之久，而不易降解。

Q：預染蛋白Marker的種類？

A：預染蛋白Marker可以分為兩種：單色預染和多色預染。Marker條帶越多參考價值越大，可就越難辨認區分，如果用不同的顏色來區別就比較好辨認啦。absin為您提供了含多種染料的預染Marker，方便您區分分子量區間。其所涵蓋的分子量范圍從10kDa到245kDa，*日常所需。

A：預染蛋白Marker與染料共價耦聯，所以在不同的緩沖條件下電泳時遷移特性可能會發生某些變化，可能導致一些偏差。不過多數情況下Marker的條帶未必能和我們的目標蛋白*一樣，我們得到的也不過是一種相對Marker指示的參考大小，zui后都需要Western來定性，所以如果不是要區分大小相近的條帶，預染Marker還是很好用的，而且也可以和未染色的蛋白標準一起使用。另外，absin提供了在常用的電泳緩沖體系下，預染蛋白Marker的相對分子量，方便使用者對分子量的預判。

Q：愛必信廣譜型蛋白預染marker特點是什么？

A：

     1、使用方便：可在冷水或熱水中快速溶解，可直接上樣，無需加熱或煮沸；

     2、與各種膜兼容：彩色條帶在WB中可轉移到膜上成像；

     3、更清晰，更易觀察；

     4、每批次均經過SDS-PAGE和WB的驗證  

     5、足量耐用：一支500ul至少跑100塊8*10cm膠

     6、不易降解

Q：愛必信廣譜型蛋白預染marker實驗結果圖？